人们只所以能看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。

  光是电磁波，波长100nm-400nm称为紫外光，400nm-780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们只所以能清楚看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。

  滤光片有很好的透光率 (可高于85%)，也就是说光能量的损失比较少。在一个荧光检测中，经过滤光片进入样本的激发光和从样本透过滤光片进入检测器的发射光都只有少量的损失(大约10%)。光的损失较少，光的能量自然较大，荧光的信号自然很容易检测。这是获得高信噪比(SNR)的最初始保证。所以，由于有高的信噪比(SNR)保证，滤光片系统从酶标仪诞生以来一直就是高灵敏度检测的黄金标准。我们也显而易见很多有光栅型酶标仪的厂家在一些检测灵敏度要求比较高的高端应用(如：TRF、TR-FRET、等)中，都会有另外配上滤光片模块的设计。因为这些高端的应用，光栅系统未能有满意的效果或干脆做不到。

  光栅系统带来方便，但也有一些缺点。基于光路设计的问题，光栅的光能损失比滤片大很多。在荧光检测中，光源经过光栅而成的激发光已比原来的少了能量。样本被激发后会放出发射光，发射光会透过光栅去分隔出需要的波长。被分隔后的发射光能量再损失。光栅酶标仪的灵敏度没有滤光片酶标仪好的，所以在高端光栅型的酶标仪也要配备滤光片模块才能进行TRF、TR-FRET等高灵敏度需求的检测。

  可分为单功能酶标仪(分为光吸收、荧光、化学发光等)和多功能酶标仪。多功能酶标仪是以上两种或更多检测模块的集成，通常情况下至少可提供光吸收、荧光这两种最常见检测功能，而一些中高端多功能酶标仪还可支持化学发光、时间分辨荧光、荧光偏振、生物发光共振能量转移，甚至还能支持“Western Blot”和“上转换发光”等检测。

  通常，酶标仪的吸光度测定范围在0～2.5之间即能够完全满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0～2.5之间，但现在大多数都做了拓宽，可达到3.5以上，并且能保持很好的精密度与线性。因此，对于酶标仪的吸光度范围不必去特意追求大的吸光度范围，主要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何

  酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀，使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能，不一样的是震板方式，有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节。使用有震板功能的酶标仪，在进行ELISA测定，显色反应完成加入终止液后，可不必振荡混匀，直接放入酶标仪测定即可。

  软件在读数前可设置读数孔、波长、计算公式等内容，在读数后显示有关数据。对于用户来说，好的软件功能，对实际在做的工作会有较大的帮助。ELISA定性测定，酶标仪如具有阳性判断值(cut-off)及其测定“灰区”(即指测定吸光度处于cut—off周围的一定区域，此区域内结果应为“可疑”)的统计计算功能，不但方便了实验室工作人员，而且在某些特定的情况下，有很高的实用价值。